CEEVEC

Protocole Book

Administrateur technique — 2026-02-24T15:53:00Z

Méthodes & Guides Techniques

Notre Protocole Book regroupe l'ensemble des procédures techniques et des recommandations méthodologiques. Il constitue une référence structurée contribuant à la reproductibilité, à la conformité scientifique et à la qualité des résultats obtenus.

Il comprend notamment :

Protocoles généraux de production des vésicules extracellulaires
Méthodes d'isolement et de purification
Bonnes pratiques de manipulation
Guides d'utilisation détaillés de nos équipements

Comment y accéder ?

Faites votre demande auprès du CEEVEC via la page « Nous contacter » du site internet. Une fois votre demande reçue, une invitation vous sera envoyée par mail pour accéder à la plateforme Résana ainsi qu'au Protocole Book du CEEVEC.

Caractérisation

Administrateur technique — 2026-02-24T13:04:00Z

Nanoparticle Tracking Analysis (NTA)

Nanosight NS300, Malvern Panalytical

Le NanoSight NS300 (Malvern) repose sur la technologie de Nanoparticle Tracking Analysis (NTA), qui mesure le mouvement brownien individuel des particules pour en déduire leur distribution en taille et de leur concentration.
Il permet une caractérisation reproductible de nanoparticules comprises entre 10 et 1000 nm, selon la configuration instrumentale. Son disque motorisé à six filtres et sa platine optique automatisée facilitent l'analyse multiparamétrique et garantissent un repositionnement précis après nettoyage. Le contrôle de température entièrement piloté par logiciel assure enfin des conditions d'acquisition stables et une fiabilité optimale des données.
Détail de l'équipement

Microfluidic Resistive Pulse Sensing (MRPS) – Analyse d'EV individuelles

ARC, Spectradyne

Le Spectradyne (ARC) repose sur la technologie Microfluidic Resistive Pulse Sensing (MRPS), qui mesure individuellement le passage de nanoparticules dans un micro‑canal pour déterminer avec précision leur taille et leur concentration à partir de 3 à 5 µL d'échantillon.
Selon la cartouche microfluidique utilisée, l'instrument permet de détecter des particules d'environ 50 à 2000 nm, avec une sensibilité élevée pour les plus petites tailles. Il intègre également des lasers d'excitation (notamment 488 nm et 642 nm) associés à des canaux de détection fluorescente dédiés, permettant l'analyse de sous‑populations marquées et l'étude multiparamétrique des vésicules extracellulaires.
Grâce à ses cartouches calibrées et à son acquisition automatisée, le système offre une excellente reproductibilité, une préparation minimale et une grande robustesse pour la caractérisation fine des nanoparticules biologiques.
Détail de l'équipement

Analyse protéique – Simple Western

Jess (ProteinSimple / Bio-Techne)

Le Jess (ProteinSimple) repose sur la technologie de Simple Western, une approche automatisée basée sur des immunoessais en capillaires, combinant électrophorèse et détection immunologique des protéines. Les protéines sont séparées selon leur masse moléculaire par électrophorèse capillaire, puis immobilisées directement dans les capillaires avant d'être détectées via des anticorps spécifiques.

Ce système permet une analyse quantitative et reproductible des protéines sur une large gamme de masses moléculaires (environ 2 à 440 kDa), avec une sensibilité élevée pouvant atteindre le niveau du picogramme. L'automatisation complète du procédé (séparation, incubations, lavages et détection) réduit fortement la variabilité expérimentale et le temps de manipulation, avec des résultats obtenus en quelques heures.

Les capacités de détection en chimiluminescence et fluorescence permettent des analyses multiplexées, ainsi qu'une normalisation directe des protéines totales dans le capillaire, garantissant des données fiables et comparables.

Détail de l'équipement

Isolation & purification

Administrateur technique — 2026-02-24T13:00:00Z

Ultracentrifugeuse

Optima XPN, Beckman ; Optima MAX-XP, Beckman

L'ultracentrifugeuse Beckman permet l'isolement des vésicules extracellulaires par ultracentrifugation différentielle et en gradient de densité, deux approches de référence pour obtenir des préparations de haute pureté.

Capable d'atteindre des vitesses supérieures à 100 000 × g, elle sépare efficacement les particules en fonction de leur densité et de leur taille, tout en préservant leur intégrité.

Les rotors adaptés aux volumes faibles ou intermédiaires offrent une grande flexibilité selon le type d'échantillon et le protocole choisi. Le contrôle précis de la température garantit des conditions stables tout au long du processus, limitant les dégradations et assurant une excellente reproductibilité.

Cet équipement constitue ainsi un outil essentiel pour l'isolement robuste et standardisé des vésicules extracellulaires.

Nous disposons de deux types d'ultracentrifugeuse : la Optima XPN et l'Optima MAX-XP.
Détail de l'équipement

Chromatographie par exclusion stérique (SEC)

Colonnes qEV, Izon

Les colonnes de chromatographie par exclusion stérique (SEC) d'Izon sont conçues pour la séparation fine des vésicules extracellulaires et autres nanoparticules biologiques sur la base de leur taille hydrodynamique, en utilisant une matrice calibrée garantissant une résolution élevée.
Disponibles en différents formats (20 nm à 70 nm), elles permettent de traiter des volumes allant de quelques centaines de microlitres à plusieurs millilitres, tout en assurant une récupération efficace des particules. Chaque colonne est pré‑emballée avec une résine de grade analytique dont la porosité et la distribution des tailles sont strictement contrôlées, assurant une élution reproductible des fractions riches en vésicules extracellulaires et une élimination efficace des protéines solubles, lipoprotéines et autres contaminants de faible masse moléculaire.
Le système s'accompagne de schémas d'élution standardisés et de volumes de collecte définis, facilitant la comparaison inter‑expériences et la mise en place de protocoles harmonisés. Grâce à leur simplicité d'utilisation, leur calibrage rigoureux et leur compatibilité avec des applications en aval (quantification, analyse biophysique ou omique), les colonnes SEC d'Izon constituent un outil robuste et fiable pour l'obtention de préparations de vésicules extracellulaires de haute pureté.
Détail de l'équipement

Filtration à flux tangentielle (TFF)

Sartoflow, Sartorius

Sartoflow Smart (Sartorius) est un système de filtration tangentielle automatisé conçu pour la concentration et le diafiltrage de biomolécules dans des volumes de l'ordre de 0,5 à 10 L, idéal pour les procédés pilotes ou les petites productions. Il fonctionne avec des casette Sartocon de différents cut‑offs (1 kDa à 0,2 µm), permettant d'adapter précisément la séparation selon la taille des particules ou des macromolécules ciblées. Son architecture intègre une pompe péristaltique à débit contrôlé, des capteurs de pression en ligne et une régulation fine de la pression transmembranaire, assurant une filtration douce qui limite le colmatage et préserve l'intégrité des vésicules extracellulaires ou autres biomolécules sensibles. Le système gère automatiquement les cycles de concentration et de diafiltration, avec un suivi en temps réel des paramètres critiques et une interface intuitive facilitant la standardisation des protocoles.
Grâce à sa conception hygiénique, ses options de nettoyage en place et la reproductibilité offerte par ses modules calibrés, le Sartoflow Smart constitue une plateforme robuste et fiable pour des opérations de purification hautement contrôlées dans les bioprocédés GMP-like.
Détail de l'équipement